編號:FISH-0200

產(chǎn)品名稱:

熒光原位雜交樣品處理試劑盒

詳詢


詳細(xì)信息:
分類:常用抗體
子分類:熒光原位雜交
規(guī)格:5次/盒
檢驗方法:1、切片脫蠟
1) 二甲苯脫蠟,10分鐘×3次;
2) 100%乙醇,5分鐘×2次;
3) 室溫晾干或45-50℃熱平臺烤片2~5分鐘。
2、預(yù)處理
1) 將切片置于80℃預(yù)熱的預(yù)處理液(50ml/缸)中12±2分鐘;實驗步驟
注意:預(yù)處理液應(yīng)該提前預(yù)熱。預(yù)熱時倒入預(yù)處理液的立式染缸需先放置于水浴中,才能打開水浴鍋的電源,并注意水浴鍋中的水位應(yīng)高于立式染缸中的液面。
2) 將切片置于室溫純水中3分鐘。
3、酶消化
1) 從純水中取出切片,小心擦去組織邊緣多余水分,注意不要損傷組織;
2) 將切片置于37℃預(yù)熱的酶消化液中15分鐘(按照組織類型自行控制消化時間在10-60分鐘之間);
注意:應(yīng)提前配制酶消化液并預(yù)熱。試劑盒中提供有酶儲存液和酶稀釋液,臨用前 1 小時混合即可。
3) 將切片拿出放置室溫純水中3分鐘;
4) 自然晾干或45-50℃熱平臺上放置2~5分鐘。
4、脫水
1) 70%乙醇,室溫1分鐘;
2) 85%乙醇,室溫1分鐘;
3) 100%乙醇,室溫1分鐘;
4) 小心擦去多余乙醇,注意不要損傷組織;
5) 自然晾干或45-50℃熱平臺上放置2~5分鐘。
5、變性雜交
按照熒光原位雜交探針的供應(yīng)商提供的說明書進(jìn)行。
6、雜交后沖洗
1) 在立式染缸中倒入50毫升的洗脫液Ⅰ,放入水浴中加熱,至少在使用前30分鐘加熱至74±1℃,可用一天,用后棄去;
注意:所測溫度是指立式染缸中洗脫液的內(nèi)部溫度。
2) 在另一個立式染缸中倒入50毫升洗脫液Ⅱ,室溫放置,可用一天,用后棄去;
3) 用鑷子小心去掉蓋玻片周圍的橡膠水泥;
4) 將切片置于室溫的洗脫液Ⅱ中,待蓋玻片自行脫落(約2~5分鐘),可上下提拉數(shù)次;
5) 將切片置于74±1℃的洗脫液Ⅰ中,輕輕搖動1~3秒,重復(fù)另一張片子;
6) 放置2分鐘;
注意: 每次最多放置6張切片。
7) 取出切片,擦去多余液體,豎直放置,避光晾干。
7、復(fù)染封片
按照熒光原位雜交探針的供應(yīng)商提供的說明書進(jìn)行。
預(yù)期用途:臨床上用于熒光原位雜交(FISH)檢測過程中的樣本處理。
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