編號(hào):PV-8000
二步法通用試劑盒(小鼠/兔超敏聚合物法檢測(cè)系統(tǒng))
詳詢
詳細(xì)信息:
分類: | 檢測(cè)系統(tǒng) |
子分類: | 非生物素法檢測(cè)系統(tǒng) |
主要成分: | 試劑1:內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑 試劑2:超敏酶標(biāo)山羊抗小鼠/兔IgG聚合物 試劑3:DAB底物緩沖液 試劑4:DAB濃縮顯色液 |
檢驗(yàn)方法: | 1、檢驗(yàn)所需儀器、設(shè)備:移液器、恒溫箱、修復(fù)儀、免疫組化筆、計(jì)時(shí)器、孵育盒、染色架、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、洗瓶。 2、試劑準(zhǔn)備:DAB顯色液需要在使用前配制。配制方法:在小試管中依次滴加底物緩沖液1mL,濃縮顯色液(棕褐色液體)50μL,混勻。配置好的DAB顯色液2~8℃避光存放,24小時(shí)內(nèi)有效。 3、操作程序: a) 脫蠟和水化 石蠟切片置于新鮮二甲苯中,浸泡10分鐘×3次;去除多余的液體后,置于無(wú)水乙醇中,浸泡3分鐘×3次;去除多余的液體后,置于95%乙醇中,浸泡3分鐘×2次;去除多余的液體后,置于75%乙醇中,浸泡3分鐘×2次;蒸餾水沖洗1分鐘,置于PBS緩沖液中。 b) 抗原修復(fù),參見(jiàn)一抗說(shuō)明書。 c) 阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶 加入適量的內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑,室溫孵育10分鐘;PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。 d) 滴加一抗 根據(jù)組織大小,滴加100μL或適量的一抗,37℃孵育60分鐘;PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。 e) 滴加超敏酶標(biāo)山羊抗小鼠/兔IgG聚合物 滴加100μL或適量的酶標(biāo)羊抗小鼠/兔IgG聚合物,37℃孵育20分鐘;PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。 f) 顯色 加入適量新鮮配制的DAB或AEC顯色液,室溫孵育5~8分鐘。 g) 復(fù)染 自來(lái)水沖洗,蘇木素染色液孵育20秒;分化、沖洗返藍(lán)。 h) 脫水、透明、封片 i) 閱片。 4、結(jié)果判定,染色結(jié)果須由有資質(zhì)的病理醫(yī)生對(duì)染色后的組織片在光學(xué)顯微鏡下觀察并進(jìn)行判讀。 |
預(yù)期用途: | 主要用于免疫組織化學(xué)染色的顯色。 |
儲(chǔ)存/效期: | 2~8℃避光保存,不得凍存;產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。 使用時(shí)即拿即放,單支試劑使用后應(yīng)立即放回冰箱,開(kāi)封后試劑有效期6個(gè)月;配制好的DAB顯色液在2~8℃避光條件下保存,24小時(shí)內(nèi)有效。 |