編號：DS-0004

產(chǎn)品名稱：

雙染檢測試劑（抗小鼠IgG/AP+抗兔IgG/HRP）
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詳細信息：
分類：檢測系統(tǒng)
子分類：DS雙染試劑盒
規(guī)格：60測試/盒,120測試/盒
主要成分：試劑1 內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
試劑2 即用型組合二抗（HRP標記抗兔IgG+AP標記抗小鼠IgG）
試劑3 顯色劑3A 顯色劑3B
試劑4 顯色劑4A 顯色劑4B
檢驗方法：1) 脫蠟和水化石蠟切片置于新鮮二甲苯中，2缸，浸泡10分鐘/缸；去除多余的液體后，置于無水乙醇中，2缸，浸泡2分鐘/缸；去除多余的液體后，置于95%乙醇中，1缸，浸泡2分鐘；去除多余的液體后，置于75%乙醇中，1缸，浸泡2分鐘；去除多余的液體后，蒸餾水沖洗，置于Ultra沖洗緩沖液中。
2) 抗原修復 高壓鍋中，加入EDTA抗原修復液，高火預熱；待修復液沸騰后將切片置于其中，并完全浸泡組織，蓋好鍋蓋，扣上壓力閥，高火繼續(xù)加熱；待限壓閥開始轉(zhuǎn)動噴氣后調(diào)至中火，同時開始計時2.5分鐘；計時結(jié)束后離開熱源，放氣降壓后將高壓鍋移入冷水中冷卻；待鍋中液體冷卻至室溫后取出切片，Ultra沖洗緩沖液浸泡清洗2分鐘×3次。
3) 滴加試劑1 加入50μL的試劑1（內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑），室溫孵育10分鐘；蒸餾水洗2次后甩干液體，用免疫組化筆在距離組織周圍2-3mm處畫圈；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
4) 根據(jù)檢測需要滴加50μL 組合一抗或空白對照試劑，37℃孵育60分鐘或2～8℃孵育過夜；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
5) 滴加試劑2 滴加50μL 試劑2，37℃孵育30分鐘；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
6) 滴加試劑3 滴加50μL試劑3，室溫孵育10-15min；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。
7) 滴加試劑4 滴加50μL試劑4，室溫孵育5-10min；自來水沖洗。
8) 復染 蘇木素染色液室溫染色30～60秒，自來水沖洗干凈，晾干。注意：需要控制蘇木素染色液的染色強度。顏色過淺或過深都會干擾顯色結(jié)果的觀察。
9) 水洗后返藍
10) 快速脫水、透明、中性樹膠封片。
11) 結(jié)果判讀 在光學顯微鏡下對染色后切片進行觀察和結(jié)果判讀。
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