Rapidcal.Immuno脫鈣液

近年來血液病呈高發(fā)趨勢，骨髓穿刺活檢更廣泛地應(yīng)用于臨床。骨髓活檢制片及免疫組化的質(zhì)量，對骨髓病理診斷起著極其重要的作用。為此，我們選用美國進(jìn)口的Rapidcal.Immuno脫鈣劑對臨床骨髓活檢標(biāo)本進(jìn)行脫鈣、制片及做相應(yīng)的免疫組化染色，結(jié)果顯示其具有脫鈣迅速、組織損害極小、并有效保留了細(xì)胞的免疫原性的特征。

1 材料與方法

選自病理科近一年來的骨髓活檢標(biāo)本30例，均為 Bouin固定液，固定>12h。將固定后骨髓標(biāo)本從中間處分成兩段，采用下面不同方式脫鈣，脫鈣液均大于標(biāo)本體積4倍。一段選用常規(guī)8%硝酸室溫脫鈣2h。另外一段選用美國Lymed公司生產(chǎn)專利產(chǎn)品Rapidcal.Immuno室溫脫鈣2h。所有脫鈣后標(biāo)本均置于流水中沖洗10min，常規(guī)脫水、透明、浸蠟及包埋切片，進(jìn)行HE及免疫組化染色。標(biāo)記物為CD3、CD4、CD79a和CD20，常規(guī)高壓修復(fù)，Polymer法檢測，DAB顯色（以上試劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）。

2 結(jié)果

Rapidcal.Immuno脫鈣處理的骨髓標(biāo)本，易于2?m連續(xù)完整切片，鏡下結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞核與漿顏色鮮艷；常規(guī)硝酸脫鈣的骨髓標(biāo)本，鏡下細(xì)胞核與漿顏色對比不明顯，染色質(zhì)不清晰。免疫組化實(shí)驗(yàn)中，Rapidcal.Immuno脫鈣處理的骨髓標(biāo)本，CD3、CD4、CD79a、CD20所標(biāo)記的T細(xì)胞和B細(xì)胞定位準(zhǔn)確，陽性表達(dá)強(qiáng)，背景清晰。常規(guī)硝酸脫鈣的骨髓標(biāo)本，抗原部分丟失，標(biāo)記物陽性結(jié)果表達(dá)較弱，背景有部分非特異性著色。

3 討論

目前，常用的化學(xué)脫鈣方法有強(qiáng)酸、螯合劑等。螯合劑多為乙烯二胺四乙酸，其性質(zhì)溫和，pH値近中性，但其脫鈣時間較長，多在40h以上，不適宜病理科常規(guī)骨髓活檢標(biāo)本。強(qiáng)酸如：鹽酸、硝酸等可以快速有效的去除骨髓組織中鈣鹽，脫鈣時間短，但雖經(jīng)流水沖洗，殘留的酸性物質(zhì)不利于細(xì)胞核著色，核漿對比不清晰，不利于形態(tài)學(xué)觀察。此外細(xì)胞表面抗原是蛋白分子，強(qiáng)酸會引起蛋白分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，抗原表位發(fā)生丟失，而使免疫組化染色結(jié)果靈敏度降低，影響病理診斷。

Rapidcal.Immuno主要成分為礦物酸及緩沖液。具有螯合劑及強(qiáng)酸脫鈣劑的優(yōu)勢，脫鈣迅速有效，骨髓穿刺標(biāo)本1-2h即可達(dá)到良好脫鈣效果。突出特點(diǎn)是這種脫鈣劑中的礦物酸與緩沖液的配合，避免了對造血細(xì)胞表面蛋白的破壞，最大限度的保留了細(xì)胞的免疫原性，并保留大部分抗原表位，對造血細(xì)胞中CD系列標(biāo)記物的檢測，靈敏性及特異性高，明顯優(yōu)于強(qiáng)酸處理的骨髓標(biāo)本，為病理診斷提供了可靠依據(jù)。（目錄編號：ZLI-9307 進(jìn)口脫鈣液）

HE差

HE好

免疫組化CD79a差

免疫組化CD79a好